海风藤酮治疗大鼠实验性急性胰腺炎
【关键词】 胰腺炎；血小板活化因子；海风藤酮；肿瘤坏死因子；白细胞介素
Role of kadsurenone in treatment of experimental acute pancreatitis in rats
【Abstract】 AIM: To explore the effect of kadsurenone on inflammatory mediators in rats during acute pancreatitis (AP). METHODS: A total of 104 SD male rats which weighed 250-300 g were randomly divided into sham group (n=24), AP group (n=40) and kadsurenone group (n=40). The animals in the groups were killed in 3, 6, 12, 24 h after operation for experimental observation. RESULTS: The serum levels of PAF, TNFα and IL6 of AP rats significantly increased （P<0.01）, and the serum level of TNFα got to a peak at 6h and the serum IL6 at 12 h after operation (P<0.01 vs sham group in each period of time). After kadsurenone was used in AP rats, the serum levels of PAF, TNFα and IL6 were significantly decreased （P<0.05）. CONCLUSION: Kadsurenone can inhibit inflammatory mediators and relieve the damages of the pancreas or lung in AP rats.
【Keywords】 pancreatitis; plateletactivating factor; kadsurenone; tumor necrosis factorα; IL6
【摘要】 目的：探讨海风藤酮对急性胰腺炎炎症介质的影响及其治疗作用. 方法：雄性SD大鼠104只，质量250～300 g，随机分为假手术对照组（n=24），急性胰腺炎组(n=40)和海风藤酮治疗组(n=40)，每组又按3，6，12，24 h分为4小组. 结果：急性胰腺炎组各时段血清PAF，TNFα，IL6显著升高，其中PAF在各时相持续升高，TNFα在6 h时达高峰，而IL6在12 h达高峰，与假手术组各个时相段比较有显著性差异（P＜0.01）；用药后治疗组各个时相段可显著降低血清PAF，TNFα，IL6的水平（P＜0.05）. 结论：海风藤酮可抑制炎症介质，明显减轻胰腺/肺组织病理损害.
【关键词】 胰腺炎；血小板活化因子；海风藤酮；肿瘤坏死因子；白细胞介素6
0引言
急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)是严重危害人类健康的急腹症，病死率高、发病机制复杂，有多种因素及炎性因子参与救治难度大. 细胞因子及炎性递质在AP的发生发展中起重要作用［1-2］. 海风藤酮（kadsurenone）是中药海风藤的提取物，我们研究海风藤酮对急性胰腺炎合并肺损伤大鼠炎症介质PAF，TNFα，IL6的影响，为探讨该药在临床上应用治疗AP的可能性提供理论和实验依据.
1材料和方法
1.1材料雄性SpraqueDawley（SD）大鼠104只，体质量250～300 g，购自西安交通大学实验动物中心. 实验动物实验前禁食12 h，自由进水. 海风藤酮（共150 mg） 购自北京大学药学院，牛磺胆酸钠购自Sigma公司，髓过氧化物酶（MPO）测定试剂盒 购自南京建成生物公司，PAF标准品购自Sigma公司，大鼠IL6 ELISA试剂盒 购自Sigma公司，大鼠TNFα ELISA试剂盒购自Sigma公司.
1.2方法采用随机数字把104只大鼠分为3组，分别为假手术对照组(n=24)，急性胰腺炎（AP）组(n=40)，海风藤酮治疗组(n=40)，每组又按术后3，6，12，24 h平均分为4个小组. 第1组大鼠术前12 h禁饮食，氯胺酮ip麻醉（1.5 mL/kg），仰卧固定，剪毛后常规消毒、铺巾，腹正中开腹，轻微刺激胰胆管后，关腹；第2组采用张群华等［3］的方法制备AP模型；第3组制模术后立即经阴茎静脉注入海风藤酮，每6 h，10 mg/kg， 1～2次. 由于海风藤酮均以DMSO(25 g/L)为溶剂，故假手术组及AP模型组均于术后经阴茎静脉注射等量的DMSO. 3组大鼠分别在术后3，6，12，24 h，氯胺酮ip麻醉（1.5 mL/kg），仰卧固定，剪毛常规消毒、铺巾，开腹. 经下腔静脉抽血4～8 mL，不加抗凝剂，凝血后离心（3000 r/min，18℃，10 min），取血清1.5～3 mL (-80℃)保存，留待进行生物法检测血小板活化因子、ELISA检测TNFα及IL6及全自动生化仪检测血清淀粉酶. 同步取胰腺组织和肺组织，部分制成组织匀浆，测定髓过氧化物酶（MPO）的活性，部分用Bouin液固定，石蜡包埋、切片，HE染色，光镜下观察胰腺及肺的炎症病理变化.
统计学处理： 采用SPSS 12.0 for Windows软件包进行统计分析，实验数据以x±s表示；组间比较用非参数秩和检验， P＜0.05为差异有统计学意义.
2结果
2.1血清淀粉酶活性AP组血清淀粉酶显著升高，到12 h时达高峰，与假手术组相比较有统计学差异（P＜0.01）；治疗组与AP组各时相段比较可降低血清淀粉酶，差异有统计学意义（P＜0.05），但仍高于假手术组各时相段（P＜0.05，表1）.
表1AP大鼠血清淀粉酶浓度的变化（略）
aP<0.05, bP<0.01 vs AP.
海风藤酮治疗大鼠实验性急性胰腺炎