环丙沙星对脑脊液氨基酸神经递质含量影响的研究

环丙沙星对脑脊液氨基酸神经递质含量影响的研究【摘要】  目的  观察静滴环丙沙星（CPLX）后患者CSF中抑制性氨基酸(GABA、Gly)和兴奋性氨基酸(Asp、Glu)含量的变化，探讨 CPLX致痫的发生机制。方法  患者静脉滴注CPLX 200mg/次，给药后60min记录脑电图，于用药前作脊髓穿刺，抽取CSF作为对照，用药后120min时抽取CSF作为试验样本，用高效液相色谱法测定CSF中氨基酸的含量。结果  静滴CPLX后可引起患者CSF中抑制性氨基酸和兴奋性氨基酸的含量发生明显的变化。用药后120min时，CSF中GABA含量为2.15±0.88μmol/L，明显高于用药前的0.62±0.18μmol/L(P<0.01)，而Asp、Glu、Gly的含量分别为10.32±2.89μmol/L、9.02±5.46μmol/L、16.73±3.95μmol/L，均明显低于用药前的15.67±4.21μmol/L、15.11±6.24μmol/L、21.78±7.21μmol/L (P<0.05～0.01)。6/21的病例脑电图出现异常波，其中1例出现频发棘波。结论  CPLX明显影响了中枢神经系统内氨基酸---神经递质的代谢平衡,导致患者神经系统不良反应，氨基酸含量的变化并可通过CSF反映出来。

　　【关键词】  氨基酸神经递质；脑脊液；高效液相色谱；环丙沙星
   
　　Study on the changes of concentration of amino acids neurotransmitter in the CSF induced by ciprofloxacin

　　【Abstract】  Objective  To evaluate the changes of concentration of inhibitory and excitatory amino acids neurotransmitter (Asp, Glu, GABA, Gly) in the CSF after intravenous drip ciprofloxacin (CPLX), and conduct an investigation into the pathogenic mechanism of epilepsy induced by CPLX. Methods  The intravenous drip ciprofloxacin 200mg.time-1 to volunteers, before dosage, the CSF of volunteers was taken out as control, electroencephalogram (EEG) was recorded at 60 min after dosage, then the CSF of volunteers was taken out again at 120min after administration as experimental samples, and the amino acids were detected with high performance liquid chromatography.Results  The concentration of inhibitory and excitatory amino acids in the CSF was obviously changed after dosage. At 120min after administration, the concentration of GABA(2.15±0.88μmol/L) was significantly higher than before dosage (0.62±0.18μmol/L, P<0.01), and Asp, Glu and Gly (10.32±2.89μmol/L、9.02±5.46μmol/L、16.73±3.95μmol/L) were obviously lower than before dosage (15.67±4.21μmol/L、15.11±6.24μmol/L、21.78±7.21μmol/L, P<0.05～0.01). There were exceptional brain wave(6/21) and frequent spike wave (1/21)in the EEG of cases.Conclussion  The metabolism balance of excitatory and inhibitory amino acid neurotransmitter affected by ciprofloxacin in the central nervous system. The turbulence of metabolism balance can be indicated through the CSF.

　　【Key words】  amino acid;neurotransmitter; cerebrospinal fluid;high performance liquid chromatography; ciprofloxacin

    文献报道，氟喹诺酮类药物(FQs)的致痫机制是阻止GABA与神经细胞相应的受体结合，而致脑神经细胞的兴奋抑制调节失调 ［1，2］。静滴环丙沙星易引起神经系统不良反应，严重者可引起癫痫大发作［3］。氨基酸是重要的神经递质之一，在中枢神经的兴奋和抑制过程中起着重要的作用。笔者研究发现静注环丙沙星（CPLX）后可引起大鼠脑脊液（CSF）中兴奋性和抑制性氨基酸神经递质含量发生明显的改变［4］，环丙沙星在临床治疗中引起的神经系统不良反应机制未见详细的文献报道。选择用CPLX进行抗感染治疗的患者，观察脑脊液(cerebrospinal fluid, CSF)中兴奋性氨基酸天门冬氨酸（aspartic acid，Asp）、谷氨酸（glutamic acid，Glu）和抑制性氨基酸γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）、甘氨酸（glycine，Gly）等氨基酸神经递质含量的变化，探讨CPLX引起神经系统不良反应的发生机制。

　　1  材料与方法

　　1.1  对象  用环丙沙星进行抗感染治疗的临床病例志愿者，男12例，女8例,年龄18～60岁。

　　1.2  试剂与仪器  环丙沙星由天津药研院太原制药厂提供。日本光电7314F型脑电图仪、美国Backman 6300型黄金系列高效液相氨基酸分析仪和JY-10型真空低温冻干机。

　　1.3  病例处理  给临床感染病例志愿者静脉滴注环丙沙星200mg/次，用药后60min记录脑电变化情况，记录时间20min，按照国际10-20系统电极安置法安放头皮电极，做单极导联和双极导联描记，并做睁闭眼、过度换气和闪光诱发等试验。以黄远桂标准进行诊断［5］。用药前抽取患者脑脊液作为对照，用药后120min抽取脑脊液作试验组，分别进行高效液相分析法测定CSF中的兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)和抑制性氨基酸γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)等4种氨基酸的含量。

　　1.4  氨基酸分析  CSF 200μl加100g/L磺柳酸30μl，混匀使蛋白析出，然后用微孔滤膜离心管10000g离心除去蛋白。去蛋白液放－80℃真空冰冻干燥机内冻干，再加pH2.3枸橼酸锂缓冲液100μl充分混合溶解后备用。处理好的样本用6300型氨基酸自动分析仪，作高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)分析，测定CSF中的谷氨酸、天门冬氨酸、γ-氨基丁酸和甘氨酸的含量。用配对t检验对实验数据进行统计分析，结果以x±s表示。